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la inmunoblotting, a menudo referida como western blotting, se utiliza para identificar dentro de una muestra de proteína antígenos específicos reconocidos por anticuerpos policlonales o monoclonales. Este procedimiento típicamente sigue a la electroforesis en gel 1D o 2D e involucra la transferencia de proteínas separadas a membranas de nitrocelulosa, la incubación de estas membranas con anticuerpos primarios y secundarios conjugados directa o indirectamente a enzimas, y la visualización de antígenos de proteínas en estas membranas utilizando reacciones de sustrato coloreado o fluorescente. En este video, proporcionamos una demostración paso a paso de un procedimiento de inmunoblotting. Hola, soy Sean Gallagher de UVP, colaboro con un centro de proteómica aquí en el Instituto de Graduados Keck. Hoy les voy a mostrar el análisis de inmunoblotting. Involucra una serie de pasos, incluyendo la separación de proteínas, el blotting de las proteínas en membranas, la inmunoprobadura y la visualización con sustratos cromogénicos y quimioluminiscentes. Así que, ¡comencemos! Antes de comenzar el inmunoblot.
