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detectar proteínas fosforiladas en un Western blot es muy similar a realizar un Western blot regular la técnica básica es la misma sds-page transferencia y detección sin embargo hay algunos consejos y trucos a considerar al detectar proteínas fosforiladas aquí hay seis consejos que pueden ayudarte a obtener los mejores resultados posibles asegúrate de mantener tus muestras y tampones en hielo las proteasas y fosfatasas endógenas en tus estados de vida digerirán y desfosforilarán las proteínas en tus muestras a temperaturas más cálidas para reducir las posibilidades de desfosforilación utiliza tampones de lisis optimizados y añade inhibidores de fosfatasa apropiados bloquea la membrana en BSA al realizar un Western blot de proteínas fosforiladas un tampón de bloqueo a base de leche no es adecuado para el Western blot de una proteína fosforilada ya que contiene caseína una proteína fosforilada así como un alto nivel de fosfatasas que pueden eliminar el fosfato de la proteína objetivo asegúrate de seleccionar un primario a