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Una vez que las proteínas se separan por electroforesis en gel, la mayoría de los flujos de trabajo de Western blot requieren transferir las proteínas separadas del gel de poliacrilamida a una membrana antes de que se puedan detectar las proteínas de interés. El método de transferencia más efectivo es la electrotransferencia, en la que se aplica un campo eléctrico perpendicular al plano del gel, haciendo que las proteínas migren hacia una membrana que une proteínas. La electrotransferencia se puede realizar utilizando sistemas de transferencia húmedos y semi-secos. Aunque cada sistema tiene características únicas, ambos requieren construir una pila o sándwich de transferencia para asegurar que el gel y la membrana estén presionados juntos. La pila de transferencia incluye el gel, una membrana cargada como nitrocelulosa o PVDF y varios trozos de papel de filtro. La transferencia de Western blot también depende de un tampón eléctricamente conductor que a menudo contiene metanol u otro disolvente para promover la unión de proteínas y ayudar a eliminar SDS del gel. Antes de construir la pila de transferencia, el gel, la membran
